本发明公开了一种检测甲型/乙型流感病毒的时间分辨免疫层析试纸条及制备方法，该试纸条包括底板以及依次黏贴在所述底板上的样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，所述结合垫上包被有时间分辨荧光微球标记的甲型/乙型流感病毒单克隆检测抗体，所述反应膜包括平行设置且相互间隔的检测区和质控区，所述检测区靠近所述结合垫，所述质控区靠近所述吸水垫，所述检测区和质控区分别包被有识别单一抗原表位的甲型/乙型流感病毒单克隆捕获抗体和羊抗鼠IgG抗体。本发明的甲型/乙型流感病毒时间分辨免疫荧光层析试纸条灵敏度高，操作简单，成本低，检测时间短，其能够有效满足临床快速检验的需求。

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